实验原理

将可溶性抗原（如禽病毒蛋白、细菌毒素、寄生虫抗原）吸附于鸡血红细胞表面（致敏红细胞），若待检血清中存在特异性抗体，可与致敏红细胞表面的抗原结合，引发红细胞凝集。通过凝集现象实现可溶性抗原的检测和血清抗体的定性 / 定量，是禽病血清学诊断的常用方法。

操作步骤

致敏红细胞制备：1% 鸡血红细胞悬液与等量纯化可溶性抗原（如鸡新城疫病毒抗原，浓度 50μg/mL）混合，37℃孵育 1 小时，期间每 15 分钟振荡 1 次；3000rpm 离心 5 分钟，生理盐水重悬为 1% 致敏红细胞悬液。

血清稀释：待检血清做 2 倍梯度稀释（1:10 至 1:1280），每孔 50μL 于 96 孔板；设阳性、阴性血清及生理盐水空白对照。

凝集反应：每孔加入 50μL 致敏红细胞悬液，混匀后 37℃孵育 30 分钟，观察凝集结果。

结果判断：阴性 / 空白对照孔无凝集，待检孔出现凝集为阳性，记录最高阳性稀释度为抗体效价。

应用

鸡新城疫、禽流感、鸡白痢、弓形虫病等禽病的血清学诊断与流行病学调查；

鸡群疫苗免疫效果评估，监测特异性抗体水平；

可溶性禽源抗原的快速检测，适用于基层实验室与现场筛查。