实验原理

抗凝血酶 Ⅲ 是血浆中重要的抗凝因子，可与凝血酶等丝氨酸蛋白酶结合，抑制其活性。在过量凝血酶存在的条件下，剩余凝血酶可催化显色底物反应，吸光度值与 AT-Ⅲ 活性呈负相关。

操作步骤

1、反应体系配制：：取 50μL 羊血浆，加入凝血酶试剂 100μL，37℃孵育 10 分钟，使 AT-Ⅲ 与凝血酶充分结合。

2、显色反应：加入显色底物溶液 100μL，37℃孵育 15 分钟，加入终止液终止反应。

3、吸光度检测：酶标仪测 405nm 吸光度值，根据 AT-Ⅲ 标准曲线计算活性（正常参考值 80%-120%）。

应用

• 研究绵羊血栓性疾病（如肺栓塞、静脉血栓）的抗凝机制；

• 评估血浆制品中抗凝血酶 Ⅲ 的活性，支撑抗凝生物药研发。