细胞换液相关问题
发布时间:2025-07-25 / 浏览数:11
一、细胞换液是否需要用 PBS 清洗
在 “贴壁细胞传代” 过程中,由于培养基中的血清会抑制胰酶活性,影响消化效果,因此必须用 PBS 清洗。但对于细胞换液,目前尚无明确资料说明是否需要 PBS 清洗,实际操作中应根据细胞具体情况判断:
1、不建议用 PBS 清洗的情况
当细胞比较 “娇气” 或生长状态不佳时,不建议用 PBS 清洗。原因有两点:一是这类细胞贴壁状态可能不牢固,PBS 冲洗会破坏其贴壁状态;二是 PBS 可能洗掉细胞分泌的生长因子,不利于细胞状态调整。若必须清洗,需缓慢操作以减少对细胞的伤害。
2、建议用 PBS 清洗的情况
当细胞生长状态良好,或显微镜下观察到细胞液较浑浊时,可选择用 PBS 清洗。这样做一方面能去除积累的代谢物,另一方面可洗脱生长状态差或衰老的细胞,有助于保持细胞活力。
二、什么是 “细胞半换液”
“细胞半换液” 又称 “细胞半量换液”,具体操作是弃掉一半旧培养基,再加入一半新培养基。选择这种换液方式的原因,与上述不使用 PBS 清洗的部分理由相近,主要包括:
1)为细胞提供适应的缓冲环境;
2)保留细胞生长过程中分泌的某些生长因子,以促进细胞生长;
3)能够节省实验材料;
4)操作更方便,例如在 96 孔板换液时,常采用排枪进行半换液;
5)对于悬浮细胞培养,半换液可用于降低细胞密度。
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