实验原理

马血清富含生长因子（如 EGF、FGF）、贴壁因子及营养成分，可替代胎牛血清（部分场景）为原代成纤维细胞（如马、小鼠源）提供体外生长所需的营养支持和贴壁信号，维持细胞活性与增殖能力。

操作步骤

1、细胞分离：取新生小鼠或马的皮肤组织，剪碎至 1mm³，用 0.25% 胰酶 37℃消化 30 分钟，过滤获得单细胞悬液。

2、培养基配制：DMEM 培养基中加入 10% 马血清、100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，混匀后过滤除菌。

3、接种与培养：将细胞悬液接种至培养瓶，37℃、5% CO₂培养箱培养；24 小时后观察贴壁情况，弃去未贴壁细胞，更换新鲜完全培养基；后续每 48 小时换液 1 次，细胞融合度达 80% 时用胰酶消化传代。

4、细胞鉴定：通过形态学观察（成纤维细胞呈梭形、排列有序）或免疫荧光检测波形蛋白（Vimentin）表达确认细胞类型。

应用

1、用于原代成纤维细胞的体外扩增，支撑细胞生物学基础研究（如细胞衰老、损伤修复机制）；

2、作为细胞模型用于药物、毒素对成纤维细胞的影响研究（如烧伤修复药物筛选）。