马血清蛋白电泳分析实验
发布时间:2025-11-26 / 浏览数:14
马血清中含白蛋白、α- 球蛋白、β- 球蛋白、γ- 球蛋白等不同组分,在电场中因分子量和电荷差异迁移率不同,通过琼脂糖凝胶电泳可将其分离;通过条带强度和迁移位置分析血清蛋白组成,反映机体生理或病理状态。
1、样本处理:马血清用生理盐水稀释 10 倍,加入上样缓冲液(含溴酚蓝)混匀;设蛋白分子量标准品。
2、电泳:制备 1% 琼脂糖凝胶,放入电泳槽( Tris - 甘氨酸缓冲液),每孔加 10μL 稀释血清,80V 恒压电泳 30 分钟。
3、染色与脱色:电泳结束后,凝胶用考马斯亮蓝 R-250 染色 2 小时,再用脱色液(甲醇:乙酸:水 = 4:1:5)脱色至条带清晰。
4、分析:用凝胶成像系统拍摄,分析各蛋白组分的条带宽度和灰度值,计算各组分占比。
1、马群健康状况评估(如肝病、肾病时白蛋白降低,感染时 γ- 球蛋白升高);
2、马血清蛋白的纯化与鉴定前的预处理分析。